{"id":4505,"date":"2024-08-28T16:33:28","date_gmt":"2024-08-28T14:33:28","guid":{"rendered":"https:\/\/www.uranyless.com\/les-uranyless\/"},"modified":"2025-07-10T11:24:31","modified_gmt":"2025-07-10T09:24:31","slug":"les-uranyless","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.uranyless.com\/fr\/les-uranyless\/","title":{"rendered":"Les Uranyless"},"content":{"rendered":"

Toutes les versions de la coloration EM Uranyless<\/h2>\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n
Edit<\/a><\/caption>\n
<\/th>\nUranyless<\/strong><\/th>\n<\/th>\nUranyless Cryo AFS\u00a0<\/strong><\/th>\nUranyless Alcohol<\/strong><\/th>\n<\/th>\n<\/tr>\n<\/thead>\n
Solvent<\/strong><\/td>\nH2O water Distiled<\/strong><\/td>\nAcetone<\/strong><\/td>\nEthanol 30%<\/strong><\/td>\n<\/tr>\n
Use\u00a0<\/strong><\/td>\nContrast agent for ultrathin sections or negative staining<\/td>\nBlock staining for AFS<\/td>\nStaining of dense and lipid-rich tissues<\/td>\n<\/tr>\n
Cryofixation\u00a0<\/td>\n<\/tr>\n
Technique\u00a0<\/strong><\/td>\nManual Staining<\/td>\nAutomatic staining for EM stain Leica or RMC grids stainer<\/td>\nManual Staining<\/td>\nManual Staining<\/td>\nAutomatic staining for EM stain Leica or RMC grids stainer<\/td>\n<\/tr>\n
Volume\u00a0<\/strong><\/td>\n30ml\u00a0<\/td>\n200ml\u00a0<\/td>\n100ml\u00a0<\/td>\n30ml\u00a0<\/td>\n200ml\u00a0<\/td>\n<\/tr>\n
Reference\u00a0<\/strong><\/td>\n11000\u00a0<\/td>\n11000-200\u00a0<\/td>\n11000C-100\u00a0<\/td>\n11000E-30\u00a0<\/td>\n11000E-200\u00a0<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

Uranyless <\/h2>\n

La solution de contraste aqueuse EM Stain Uranyless est une alternative au d’ac\u00e9tate d’uranyle. Comme recommand\u00e9 par Reynolds (1963), il est fortement conseill\u00e9 de renforcer le contraste initial (Uranyless) avec du citrate de plomb dans une atmosph\u00e8re satur\u00e9e de NaOH afin d\u2019\u00e9viter toute contamination par le CO\u2082 atmosph\u00e9rique. <\/p>\n

Pour faciliter l’utilisation du citrate de plomb lors du contraste, il est conditionn\u00e9 dans des flacons AirLess (sans air et donc sans CO\u2082). Vous pouvez conserver ce flacon de 30 ml pendant une longue p\u00e9riode sans risque de contamination au CO\u2082, un probl\u00e8me fr\u00e9quent pour les microscopistes. <\/p>\n

Le conditionnement en flacon AirLess<\/a> de 30 ml permet de r\u00e9aliser le contraste de plus de 1500 grilles.<\/p>\n

Cet emballage est doublement efficace : il offre une longue dur\u00e9e de conservation et g\u00e9n\u00e8re un minimum de d\u00e9chets.<\/p>\n

Pour l’utilisation de UranyLess Aqueous dans des dispositifs de contraste automatis\u00e9s comme le EM Stain de Leica, UranyLess est disponible en flacon de 200 ml. Il convient de noter que UranyLess Aqueous est conditionn\u00e9 dans un flacon AirLess pour faciliter la distribution en gouttes uniquement, car il n’est pas affect\u00e9 par l’air ni par la lumi\u00e8re. <\/p>\n

Protocoles d’utilisation pour le contraste classique<\/h2>\n

Protocole Classique : Protocole de Double Contraste sur Coupes Ultrafines avec UranyLess \/ Citrate de Plomb
Ce protocole est adapt\u00e9 aux \u00e9chantillons biologiques pr\u00e9alablement fix\u00e9s selon des m\u00e9thodes conventionnelles, telles que l’utilisation de glutarald\u00e9hyde, osmium, ruth\u00e9nium, et inclus dans des r\u00e9sines \u00e9poxy (Epon, Araldite, Spurr) ou acryliques (LRWhite, HM20, etc.).<\/p>\n

Protocole de Contraste :<\/p>\n

    \n
  1. D\u00e9posez une goutte de UranyLess sur du parafilm ou toute autre surface hydrophobe.<\/li>\n
  2. Placez la grille sur la goutte de UranyLess pendant 1 \u00e0 2 minutes.<\/li>\n
  3. Tamponnez la grille sur du papier filtre, puis rincez-la d\u00e9licatement avec de l’eau distill\u00e9e.<\/li>\n
  4. Laissez s\u00e9cher.<\/li>\n
  5. Apr\u00e8s s\u00e9chage, renforcez le contraste avec du citrate de plomb, selon la m\u00e9thode de Reynolds (1963) :<\/li>\n
  6. Placez la grille sur une goutte de citrate de plomb, en suivant la m\u00e9thode de Reynolds, dans une atmosph\u00e8re satur\u00e9e en sodium pendant 1 minute. <\/li>\n
  7. Tamponnez la grille sur du papier filtre, puis rincez-la d\u00e9licatement avec de l’eau distill\u00e9e. <\/li>\n
  8. Laissez s\u00e9cher.<\/li>\n<\/ol>\n

    \"Coloration<\/p>\n

    Coloration N\u00e9gative<\/h2>\n
    \n

    La coloration n\u00e9gative est une technique tr\u00e8s utile en microscopie \u00e9lectronique, qui permet de caract\u00e9riser la morphologie de particules isol\u00e9es telles que des bact\u00e9ries, des virus, des prot\u00e9ines, des nanoparticules, des liposomes, des exosomes, etc.<\/p>\n

    Protocole de coloration :<\/strong><\/p>\n

      \n
    1. Sur une feuille de Parafilm ou toute autre surface hydrophobe, d\u00e9posez une goutte d’environ 10 \u00b5l de votre solution ainsi qu’une goutte d’UranyLess.<\/li>\n
    2. \u00c0 l’aide de pinces fines, placez une grille recouverte d\u2019un film formvar-carbone sur la goutte de votre \u00e9chantillon. Laissez en contact pendant environ 1 minute. <\/li>\n
    3. \u00c9gouttez la grille \u00e0 l’aide de papier filtre.<\/li>\n
    4. Contrastez la grille en la mettant en contact avec la goutte d’UranyLess pendant 1 minute.<\/li>\n
    5. \u00c9gouttez, laissez s\u00e9cher pendant 5 minutes, puis observez au microscope.<\/li>\n<\/ol>\n<\/section>\n
      \n

      Affiner la technique :<\/strong><\/p>\n

        \n
      • Parfois, vous pouvez avoir tr\u00e8s peu d’\u00e9chantillon sur votre grille ; dans ce cas, ionisez votre grille.<\/li>\n
      • Si vous avez trop d’\u00e9chantillon, rincez-le sur une goutte d’eau avant de le contraster.<\/li>\n
      • Si la coloration est trop intense, rincez pendant 1 minute dans de l’eau apr\u00e8s avoir contrast\u00e9 avec UranyLess.<\/li>\n<\/ul>\n<\/section>\n

        Uranyless Cryo<\/h2>\n

        Uranyless anhydre en ac\u00e9tone est principalement utilis\u00e9 pour les m\u00e9thodes cryog\u00e9niques, telles que la cryosubstitution AFS. Cette solution est id\u00e9ale pour les applications n\u00e9cessitant un m\u00e9lange avec des solutions fixatives telles que le PFA, le glutarald\u00e9hyde ou l\u2019OsO\u2084, et elle est particuli\u00e8rement adapt\u00e9e \u00e0 l\u2019inclusion cryog\u00e9nique en r\u00e9sine. <\/p>\n

        Protocol:<\/strong><\/p>\n

          \n
        1. Pr\u00e9paration <\/strong>: M\u00e9langez Uranyless anhydre avec de l\u2019ac\u00e9tone \u00e0 100 %.<\/li>\n
        2. Lavage <\/strong>: Effectuez un lavage \u00e0 l\u2019ac\u00e9tone \u00e0 100 % deux fois pendant 30 minutes chacune.<\/li>\n
        3. Application du contraste <\/strong>: Utilisez Uranyless anhydre pour cryo dans de l\u2019ac\u00e9tone.<\/li>\n<\/ol>\n

          Notes suppl\u00e9mentaires :<\/strong>
          Uranyless en ac\u00e9tone est une solution \u00e0 base de lanthanides, sp\u00e9cialement formul\u00e9e pour les applications de cryofixation AFS. Lorsqu’il est utilis\u00e9 en combinaison avec OsO\u2084, il est recommand\u00e9 de suivre un protocole sp\u00e9cifique afin d’\u00e9viter les interactions ind\u00e9sirables qui pourraient r\u00e9duire l’efficacit\u00e9 de Uranyless. <\/p>\n<\/p>\n

          Uranyless Alcool<\/h2>\n

          Uranyless en \u00e9thanol est utilis\u00e9 pour le contraste des tissus tr\u00e8s denses et riches en lipides, qui sont souvent difficiles \u00e0 colorer avec d\u2019autres agents. La solution \u00e0 30 % d\u2019\u00e9thanol permet au contraste de p\u00e9n\u00e9trer efficacement, en particulier dans les tissus riches en collag\u00e8ne dense, comme la corn\u00e9e. Cette concentration repr\u00e9sente un compromis id\u00e9al, assurant une p\u00e9n\u00e9tration en profondeur sans dissoudre les structures lipidiques. <\/p>\n

          Protocol:<\/strong><\/p>\n

            \n
          1. Contraste <\/strong>: Appliquez Uranyless\/\u00e9thanol pendant 2 \u00e0 3 minutes.<\/li>\n
          2. Lavage <\/strong>: Rincez avec de l\u2019alcool \u00e0 30 % pendant 1 minute, puis tamponnez.<\/li>\n
          3. Contraste suppl\u00e9mentaire<\/strong> : Appliquez du citrate de plomb #11 300 (Reynolds) pendant 1 \u00e0 2 minutes.<\/li>\n<\/ol>\n

            Notes suppl\u00e9mentaires :<\/strong>
            Uranyless est pr\u00e9par\u00e9 dans une solution de 30 % d\u2019\u00e9thanol avec de l\u2019eau, ce qui facilite la p\u00e9n\u00e9tration du contraste, en particulier dans les tissus riches en collag\u00e8ne dense.<\/p>\n

            \t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\"EM\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t<\/p>\n